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如表是几种限制梅识别序列及其切割位点

发布日期:2019-07-15 07:24   来源:未知   阅读:

  (1)图1中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位.氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因作为标记基因,其作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞).

  (2)用图中质粒和目的基因构建重组DNA,应选用BclI和HindIII两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒.将重组质粒导入大肠杆菌时,先用Ca2+(或CaCl2)处理细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞.

  (3)一个基因表达载体的组成,除了图1中质粒所示结构外,还应具有终止子和目的基因.

  分析图2:质粒上有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII三种限制酶的识别序列和切割位点,其中BamHⅠ的切割位点位于两种抗生素抗性基因上.

  解答解:(1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位.标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞).

  (2)目的基因两侧有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII和Sau3AI的切割位点,若用限制酶BamHⅠ或Sau3AI切割会破坏质粒上两种抗性基因,因此用图中质粒和目的基因构建重组DNA时,应选用BclI和HindIII两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒.将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法,即先用Ca2+(或CaCl2)处理细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞.

  (3)基因表达载体的组成除了图中的启动子、标记基因(抗生素抗性基因)外,还有终止子和目的基因.

  (4)由于选用BclI和HindIII两种限制酶构建基因表达载体时,破坏了氨苄青霉素抗性基因,但没有破坏四环素抗性基因,因此切割构建为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌,应在选择培养基中添加四环素.由于限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII的识别序列都能被Sau3kI识别,因此用Sau3kI切图质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段.

  (1)RNA聚合酶 鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞)

  点评本题结合基因结构图和运载体结构图,考查基因工程的技术和原理,重点是限制酶和DNA连接酶,要求考生认线,能根据图中和表中信息选择合适的限制酶,准确判断使用DNA连接酶连接的结果,再运用所学的知识答题.

  (2)步骤③中接种的方法是平板划线)若步骤②中得到的菌落类型有5种,则步骤④中需要设计至少15个实验组,对实验组的操作是接种每种活菌的培养基中分别添加A、B、C抗生素.

  (4)若将所得菌落接种到含有伊红美蓝培养基中,形成的菌落呈黑色,则表明可能存在大肠杆菌.从功能角度分析此培养基属于鉴别培养基.

  科目:高中生物来源:2015-2016广东揭阳市高一下第一次月考生物试卷(解析版)题型:选择题

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  (1)若用缺镁的完全培养液培养,叶肉细胞内叶绿素合成减少,从而影响植物对红光和蓝紫光光的吸收.

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  题型:解答题11.玉米(2n=20)是雌雄同株(开单性花)的植物,玉米的红粒(A)和黄粒(a)、非甜(B)和甜(b)分别位于不同对染色体上.(1)用玉米进行杂交实验与用豌豆进行杂交实验相比较,不需要进行的操作是去雄.(2)现在用多株红粒玉米与黄粒玉米杂交,子代红粒玉米与黄粒玉米的比例为11:1,则亲代红粒玉米植株中杂合于所占比例为$\frac{1}{6}$.(3)AaBb的玉米自交,取子代中的红粒非甜玉米,让它们进行自由传粉,则所得后代中红粒甜玉米所占比例为$\frac{8}{81}$.(4)非甜玉米Bb自交,如果由于某种原因使含B的花粉有1/4死亡,则子代的甜玉米所占的比例为$\frac{2}{7}$.(5)现有一种三体红粒玉米,细胞中5号染色体的同源染色体有三条,即染色体数为2n+1=21,且该三体玉米的基因型为Aaa.若5号染色体3条之间的任意2条联会的概率均等,则该三体红粒玉米会产生四种配子aa、Aa、A、a,其比例为1:2:1:2.